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目前,对大豆β淀粉酶的研究还不如对α-淀粉酶的研究。为了产生β淀粉酶,其过去主要是从植物中提取的,因为1974年发现微生物可以产生β淀粉酶。来自微生物的β-淀粉酶的研究也很活跃,已经在工业生产中应用。
1、提取植物β-淀粉酶
我国的麦麸和红薯的产量很高。价格低廉,可以从中提取β-淀粉酶代替麦芽,用于生产麦芽糖和啤酒酶。但是,如果提取方法不当,则成本很高,特别是对于干酶制剂。
(1)从番薯中提取β-淀粉酶
从红薯果肉中提取淀粉后的新鲜废水的pH值调节为3.7-4.5,可以沉淀80%的β-淀粉酶。 β淀粉酶也可以被活性高岭土吸附,以降低回收成本。也可以将硫酸铵添加到已过滤淀粉的废水中,使其饱和度达到50%-60%。透析并用填料干燥后,盐析产物的产率为50%。但是在低浓度的情况下,上述方法是不经济的。
(2)从麸皮中提取β-淀粉酶
向麸皮中加水:(5-7),将其在pH 6、45°C下浸泡一定时间,向滤液中添加硫酸铵至饱和度为50%至55%,以盐析。通过透析和包装干燥分级的沉淀物,酶的产率达到50%。麸皮中的淀粉酶与大麦麦芽中的淀粉酶具有相同的活性,但不含α-淀粉酶,适用于生产麦芽糖浆。
2、微生物β-淀粉酶的产生
由于植物β-淀粉酶的生产成本较高,源自微生物的β-淀粉酶已引起越来越多的关注。目前,对产生β-淀粉酶的菌株的研究较多的是多粘芽孢杆菌,巨大芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌,圆形芽孢杆菌和链霉菌。
以吸水链霉菌产生β-淀粉酶为例。
制备培养基:种子培养基,发酵培养基。
栽培方法:将菌株接种于9L种子培养基中,在28℃下通气,搅拌下培养24h,然后连接发酵罐进行栽培:
将300L发酵培养基添加到600L发酵罐中,在121℃下灭菌30分钟,然后冷却,接种在副罐中培养的种子,在28℃下充气并在搅拌下培养85小时。
提取:发酵结束时,将发酵液在40°C的减压条件下过滤,使其体积达到原来的1/5。然后将2倍体积的冷乙醇加入浓缩溶液中以沉淀淀粉酶。干燥的沉淀物是粗制酶制剂,酶活性通常高达40,000 U / g。